347 хемиски состав од нерѓосувачки челик Големината на венската или капиларната крв, специфична за одговорите на САРС-КоВ-2, Т-клетките го одредува имунитетот на СОВИД-19.

Ви благодариме што ја посетивте Nature.com.Користите верзија на прелистувач со ограничена поддршка за CSS.За најдобро искуство, препорачуваме да користите ажуриран прелистувач (или да го оневозможите режимот на компатибилност во Internet Explorer).Покрај тоа, за да обезбедиме постојана поддршка, ја прикажуваме страницата без стилови и JavaScript.
Лизгачи кои прикажуваат три статии по слајд.Користете ги копчињата за назад и следно за да се движите низ слајдовите или копчињата на контролорот на слајдовите на крајот за да се движите низ секој слајд.

347 хемиски состав од нерѓосувачки челик

Хемиски состав на цевка од нерѓосувачки челик 347

Хемискиот состав и механичките својства на калемната цевка од нерѓосувачки челик 347 се како што следува:
- Јаглерод – 0,030% макс
- хром - 17-19%
- Никел - 8-10,5%
- Манган - 1% макс

Механички својства на цевка од нерѓосувачки челик 347

Според производителот на серпентина цевка од нерѓосувачки челик 347, механички својства на 347 серпентина цевка:
- Јачина на истегнување (psi) – 75.000 мин
- Јачина на принос (psi) – 30.000 мин
- Издолжување (% во 2″) – 25% мин
- Цврстина на Бринел (BHN) – 170 макс

Апликации и употреба на цевка од нерѓосувачки челик 347

• Цевка од нерѓосувачки челик 347 што се користи во мелници за шеќер.
• Цевка од нерѓосувачки челик 347 што се користи во ѓубриво.
• Цевка од нерѓосувачки челик 347 што се користи во индустријата.
• Цевка од нерѓосувачки челик 347 што се користи во електрани.
• Цевка од нерѓосувачки челик 347 што се користи во храна и млечни производи.
• Цевка од нерѓосувачки челик 347 што се користи во постројки за нафта и гас.
• Производител на цевки од нерѓосувачки челик 347 што се користи во индустријата за бродоградба.

Се смета дека Т-клетките специфични за САРС-КоВ-2 штитат од инфекција и прогресија на СОВИД-19, но не постојат директни докази за тоа.Овде, ги споредивме мерењата на целата крв на SARS-CoV-2-специфични интерферон-γ позитивни Т-клетки со позитивни резултати од дијагностички тест за COVID-19 (PCR и/или страничен проток) во рок од 6 месеци од собирањето на крвта на Лиан.Меѓу 148 учесници кои донирале примероци од венска крв, големината на одговорот на Т-клетките специфичен за SARS-CoV-2 беше значително поголем кај оние кои останаа заштитени отколку кај оние кои беа заразени (P <0,0001).% ризик од инфекција, додека високиот интензитет го намалува овој ризик на 5,4%.Овие резултати беа генерализирани на дополнителни 299 учесници кои тестираа скалабилна анализа на капиларна крв што може да го олесни пристапот до податоците за имунитетот на Т-клетките во размер на населението (14,9% наспроти 4,4%).Така, мерењето на Т-клетките специфични за SARS-CoV-2 може да го предвиди ризикот од инфекција и треба да се евалуира кога се следи имунолошкиот статус на поединецот и населението.
Мерењето и разбирањето на имунолошкиот одговор на инфекцијата САРС-КоВ-2 е важно за да се развијат ефективни идни стратегии за минимизирање на јавното здравје и економските влијанија од идните епидемии на СОВИД-19.Идентификувањето на имунолошките корелации ќе обезбеди важни информации за подложноста на популацијата на вирусна инфекција, можеби рано предупредување за врвни хоспитализации, а исто така ќе им овозможи на луѓето лично да управуваат со ризикот од инфекција и ризикот од инфицирање други.Имунолошкиот надзор се покажа како критичен за да се оцени ефикасноста на вакцините за COVID-19 кај здрави и високоризични пациенти1,2,3 особено кај мутанти на SARS-CoV-24, а откривањето на имунокомпромитирани ќе значи потреба за зајакнување на имунитетот. Вакцинирајте се и спречите идни епидемии.
Нивото на имунитет на поединецот на инфекција со САРС-КоВ-2 зависи од повеќе фактори: вирусно оптоварување во моментот на изложување, варијанти на вируси, возраст, претходен статус на вакцинација/инфекција, коморбидитети, лекови и што е најважно, инфекција против САРС-КоВ .2 адаптивниот имунолошки одговор се јавува во моментот на изложеност на вирусот5.Евалуацијата на имунолошкиот одговор на инфекција со SARS-CoV-2 и/или вакцинација се фокусираше на серолошки анализи кои го мерат присуството на антитела специфични за структурен протеин (на пр. шилести гликопротеини).Сепак, присуството или отсуството на антитела сами по себе не го одредува точно заштитниот имунолошки одговор, бидејќи одговорите значително се намалуваат со текот на времето6 и неутрализацијата на варијантите на SARS-CoV-2 кај закрепнати или двојно вакцинирани лица Слаба активност, што може да доведе до голема број на пробивни инфекции7.Навистина, заштитата од симптоматски COVID-19 предизвикана од варијантата Omicron (B.1.1.529) опадна на околу 10% по само 4-6 месеци вакцинација со mRNA, иако заштитата од тешка болест опстојуваше >68% најмалку 7 месеци8.Мерењето на одговорите на адаптивните мемориски Т-клетки, кои обезбедуваат долготрајна заштита од вирусна инфекција, е најдобар показател за подложност на инфекција со SARS-CoV-2, а со тоа и подобар показател за ризикот од позитивно тестирање за COVID-199, бидејќи специфичен Т клетките можат да спречат инфекција.без сероконверзија10,11.Сепак, мерењето на одговорите на Т-клетките доби помалку внимание поради методолошките потешкотии и логистичките проблеми во добивањето и транспортирањето на примероци од венска крв, особено кога се спроведуваат големи опсервациски студии за да се процени ефикасноста на вакцината и да се следи имунитетот.Сепак, вакцинираните лица покажуваат силна активност на Т-клетките против варијантите на САРС-КоВ-2, потенцијално неутрализирајќи ја загубата на реактивноста на антителата за да се ограничи сериозноста на СОВИД-1912,13.
Овде, се обидовме да разбереме дали едно мерење на одговорот на САРС-КоВ-2 Т-клетката може да го предвиди апсолутниот ризик од инфекција со САРС-КоВ-2 во рок од 6 месеци од земање примерок од крв, без оглед на претходните фактори кои влијаат на имунитетот.За да го направиме тестот за Т-клетки со висока пропусност и применлив за поголеми студии, се обидовме и да го направиме тестот минијатуризиран за да може да се изврши со помош на капиларен примерок од крв од прст.
Ги меривме клеточните и хуморалните имунолошки одговори кај здрави донатори користејќи комбинирано откривање на SARS-CoV-2 Т-клетки и IgG антитела врз основа на целата венска крв (за карактеристиките на учесниците, видете март 2022 година 14. Кај вакцинирани донатори, SARS-CoV-2- специфичните Т-клеточни одговори беа утврдени со мерење на плазматските нивоа на интерферон-γ (IFN-γ) по стимулација на целата крв со пептид SARS-CoV-2 (како претходно, реф. 14,15,16,17,18) и IgG одговори поврзани со нуклеокапсид (N) беа зголемени кај оние кои пријавиле претходна инфекција, иако двата одговора беа повисоки кај претходно инфицирани невакцинирани донори, максимални во телото (сл. 1а, б). беа највисоки кај претходно инфицирани вакцинирани донори (слика 1в-д).
одговорите на IFN-γ+ Т-клетките специфични за SARS-CoV-2 беа измерени со венска анализа на целокупната крв и врз основа на вакцинациите на учесниците и претходниот статус на инфекција со SARS-CoV-2 (потврден со PCR и/или тест за латерален проток)' Vac + /Inf +' n = 60 (зелено), 'Vac + /Inf-' n = 82 (сино), 'Vac-/Inf +' n = 4 (жолта), 'Vac-/Inf-' n = 1 (не се применува).Реакциите за врзување на IgG специфични за SARS-CoV-2 го таргетираат нуклеокапсидот („N“) (б; ****P <0,0001, **P = 0,0016), шилест домен за врзување на рецепторите („RBD“) (в; ** P = 0,0022, *P <0,015), шилеста подединица 1 („S1“) (d; ***P = 0,0005, *(Vac + /Inf+ наспроти Vac + /Inf-) P = 0,022, *(Vac- /Inf+ наспроти Vac+/Inf-) P = 0,012) и врвната подединица 2 („S2“) (д) беше измерена со венски тестови на целосна крв и врз основа на вакцинација на учесниците и претходна SARS -CoV-2 (потврдена со PCR и/ или тест за латерален тек) инфективен статус.'Vac + /Inf +' n = 60 (зелено), 'Vac + /Inf-' n = 71-82 (сино), 'Vac-/Inf +' n = 4 (жолта).Споредбите беа направени со користење на тестот Крускал-Волис, приспособен за повеќекратни споредби користејќи го Дан тестот.Податоците се прикажуваат како графикони (средишна линија на средна, горна граница на 75-ти перцентил, долна граница на 25-ти перцентил) со мустаќи на минималните и максималните вредности.Секоја точка претставува донатор.Необработените податоци се обезбедуваат во форма на датотеки со необработени податоци.
По земање мостри од крв, од учесниците беше побарано сами да пријават позитивни резултати од тестот за PCR и/или латерален проток за COVID-19;ако учесниците биле позитивни помеѓу 1 септември 2021 и 29 декември 2021 година, се претпоставувало дека се заразени со Delta (B.1.617.2) варијанта на коронавирус и Omicron (B.1.1.529) во Јавното здравство Велс по 29 декември 2021 година, кога оваа опција на загриженост станува доминантна.Меѓу 148 вредни донатори, забележавме стапка на инфекција од 26,3% (39/148) во рок од 6 месеци од дарувањето крв, од кои 38 примија втора или трета доза од вакцината COVID-19 (пробивот на инфекцијата се случи по Pfizer/BioNTech ( BNT162b2) mRNA вакцина или AstraZeneca вакцина (ChAdOx1 nCoV-19));бил заразен и невакциниран дарител.Големината на SARS-CoV-2-специфичните IFN-γ-позитивни Т-клеточни одговори беше значително помала кај оние кои пријавиле позитивен дијагностички тест за COVID-19 отколку кај неинфицирани донатори (P <0,0001; Сл. 2а), главно поради оптимална индукција на одговорите на Т-клетките со вакцинација кај некои учесници (P = 0,050; Дополнителна слика 1).Немаше корелација помеѓу големината на одговорот на IFN-γ+ Т-клетката и времето до позитивен резултат од тестот COVID-19 (Дополнителна слика 2).Спротивно на тоа, ниту одговорите на RBD-, S1-, S2-врзувачките IgG (слики 2б-г) ниту одговорите на антитела кои неутрализираат RBD-, S1 беа специфични за дивиот или делта SARS-CoV-2 (B.1.617).) (Дополнителна слика 3) може да прави разлика помеѓу луѓе со ризик од инфекција.Сепак, ниските N-поврзани IgG одговори против SARS-CoV-2 корелираат со ризикот од инфекција со COVID-19 (P = 0,0084; Слика 2e);оние кои биле позитивни на тестот имале 85% помала веројатност (P = 0,00035; ИЛИ 0,15, 95).% CI: 0,047-0,39 (Дополнителна слика 4).
Примероците од венска крв од здрави донатори (n = 148) ги процениле одговорите на IFN-γ+ Т-клетките специфични за SARS-CoV-2 (а; ****P <0,0001) и врзувањето на рецепторот Spike за специфичниот SARS-CoV -2 стимул.домен („RBD“) (б), подединица шилец 1 („S1″) (в), шилец 2 подединица („S2″) (d) и нуклеокапсид („N“) (д; **P = 0,0084 ) .Идентификувани учесници кои тестирале позитивно за COVID-19 (PCR и/или страничен проток);сите инфекции се случиле во рок од 6 месеци по земањето крв.Споредбите беа направени со помош на тестот Ман-Витни со две опашки.Податоците се прикажуваат како графикони (средишна линија на средна, горна граница на 75-ти перцентил, долна граница на 25-ти перцентил) со мустаќи на минималните и максималните вредности.Секоја точка претставува донатор.ns не е важно.Топлинската карта f ги прикажува корелациите на рангот на Спирман помеѓу променливите за одредената база на податоци.Споредбите кои не беа статистички значајни беа исклучени од матрицата и означени со празни ќелии.Необработените податоци се обезбедуваат во форма на датотеки со необработени податоци.
Претходно поставениот дијагностички позитивен прекин од 14 се сметаше за премногу произволен за да се процени ризикот од повторна инфекција, така што беа воспоставени интерквартилни опсези за да се утврдат апсолутни параметри на ризик.Статистичкиот модел, кој вклучуваше само променливи кои имаа значаен ефект врз резултатите, покажа дека големината на одговорот на IFN-γ+ Т-клетката специфични за SARS-CoV-2 беше најважниот имунолошки биомаркер за одредување на шансите на поединецот да биде тестиран за КОВИД.-19 позитивни (слика 2ѓ и дополнителна слика 4).Пациенти со SARS-CoV-2 специфичен IFN-γ+ Т-клеточен одговор во третиот (194-489 pg/ml IFN-γ) и четвртиот (>489 pg/ml IFN-γ) квартал 65% (P = 0,055; ИЛИ 0,35, 95% CI: 0,11-1,00) и 90% (P = 0,0050; ИЛИ 0,098, 95% CI: 0,014-0,42) имаа повеќе учесници.Шансите се мали (Дополнителна слика 4).Севкупно, учесниците со одговор на САРС-КоВ-2 специфичен Т-клеточен одговор од венска крв ≤79 pg/mL IFN-γ имале 43,2% ризик од пробивна инфекција на 6 месеци, во споредба со одговорот >489 pg/mL.ml IFN-γ имаше ризик од инфекција од 5,4% (табела 2).
Тестирањето на целата венска крв е ограничено во обем поради потребата за собирање примероци од страна на флеботомистот.За да се зголеми достапноста на тестовите на Т-клетките и IgG за САРС-КоВ-2, развиен е алтернативен метод за земање примероци од капиларна крв за да им се овозможи на учесниците да добијат примероци од крв од прсти дома.Според нашите сознанија, немаше претходни извештаи за мерење на антиген-специфичната функција на Т-клетките во примероците од капиларна крв.Претходно беше покажана силна корелација помеѓу бројот на лимфоцити добиени со користење на споредливи примероци од капиларна и венска крв.Дополнително, пријавено е дека анализите базирани на целосна крв за мерење на одговорот на Т-клетките специфични за SARS-CoV-2 користат само 320 μL венска крв,20 елиминирајќи ја загриженоста за зачестеноста на прогениторните Т-клетки во примероците од капиларна крв.
Ја користевме оваа стандардизирана колаборативна анализа на САРС-КоВ-2 Т-клетките и IgG антителата базирани на капиларна целосна крв за мерење на клеточниот и хуморалниот имунолошки одговор кај учесниците со различни коморбидитети и претходен статус на вакцинација/инфекција (Табела 1).регрутирани од цела ОК помеѓу 24 јануари и 14 март 2022 година14. Поголемиот дел (90,9%) од примероците на прстите беа правилно добиени и испратени во лабораторија во рок од 24 часа од собирањето.Во некои случаи, примероците беа примени во рок од 48 часа по земањето крв, но ниту еден од овие примероци не помина контролни контроли на квалитетот и не влијаеше на вкупните мерења на Т-клетките или антителата (Дополнителна слика 5).Иако имаше разлики во големината на одговорот на IFN-γ+ Т-клетката специфичен за SARS-CoV-2, измерен во соодветните примероци од капиларна и венска крв кај некои поединци, немаше значителни разлики во целина (P = 0,88; Дополнителна слика 6 ).).
Одговорите на IFN-γ+ Т-клетките специфични за SARS-CoV-2 беа значително зголемени кај вакцинирани лица кои исто така пријавиле претходна инфекција (P = 0,0001), но не значително повисоки отколку кај претходно инфицирани невакцинирани индивидуи донатори (P = 0,19, Сл. 3а).).Одговорите на IgG против скоковиот гликопротеин (RBD, S1, S2) беа значително повисоки кај вакцинирани донатори отколку кај невакцинирани донатори, без оглед на статусот на претходна инфекција (Слика 3б-г).Интересно, просечниот N-врзан одговор на IgG беше највисок кај претходно заразените невакцинирани учесници во споредба со вакцинираните учесници, иако ова не достигна значајно (Слика 3д).Помеѓу невакцинираните и неинфицираните донатори кои се самопрогласиле, 15 од 37 (40,5%) учесници биле позитивни на N-поврзан IgG, над претходно утврдениот праг од 2,0 BAU/mL14;овие 15 учесници Дванаесет од овие пациенти биле позитивни на IFN-γ+ Т-клеточниот одговор над претходно утврдениот праг од 22,7 pg/mL IFN-γ14.Затоа, веројатно е дека овие учесници биле претходно заразени со САРС-КоВ-2 и не биле тестирани за КОВИД-19 поради личен избор, недостаток на опрема за PCR и/или страничен проток или биле асимптоматски.Иако постоеше значајна корелација помеѓу одговорите на Т-клетките на нивоата на IFN-γ+ и N-поврзани IgG кај невакцинирани донори (P = 0,0044; Дополнителна слика, N-поврзаниот IgG одговор се намали побрзо од N-поврзаниот IgG одговор, додека IFN-γ + Одговорите на Т-клетките беа задржани без оглед на статусот на вакцинација, иако бројот на донатори на 50 недели по предизвикот беше низок (Дополнителна слика 8). Типот на вакцинација генерално беше малку различен во набљудуваните одговори на IgG специфични за SARS-CoV-2, T клетките и поврзаните со RBD, иако учесниците кои примиле две дози BNT162b2 проследени со mRNA1273 ревакцинација покажале значително повисоки нивоа на IFN-γ + Т-клетки биле почувствителни на SARS-CoV-2 од оние кои примале две дози ChAdOx1 и BNT162b2 (Дополнителен Сл. 9) Дополнително, пријавените коморбидитети имаа мала вкупна разлика во набљудуваните одговори на Т-клетките во споредба со здравите донатори (Дополнителна слика 10).
одговорите на IFN-γ+ Т-клетките специфични за SARS-CoV-2 беа измерени со анализа на капилари на целата крв и беа засновани на вакцинациите на учесниците и претходниот инфективен статус на SARS-CoV-2 (потврден со PCR и/или латерален тест за проток).'Vac + /Inf +' n = 42 (зелено), 'Vac + /Inf-' n = 158 (сино), 'Vac-/Inf +' n = 33 (жолта), 'Vac- /Inf-' n = 37 (сива).****P <0,0001, ***P = 0,0001, *(Vac+/Inf- наспроти Vac-/Inf-) P = 0,045, *(Vac-/Inf+ наспроти Vac-/Inf-) P = 0,014 .Специфични реакции на врзување на IgG на SARS-CoV-2 на доменот за врзување на рецепторот на шилеста („RBD“) (b; ****P <0,0001, ns: не е значајно), шилеста подединица 1 („S1“) (c; * * **P <0,0001, ns: незначително), подединица 2 („S2″) (d; ****P <0,0001, ***P = 0,0005, *P = 0,016 ) и нуклеокапсид („N“) (д; ****P <0,0001, ns не е значајно) беа измерени со помош на анализа на венска целосна крв и врз основа на вакцинациите на учесниците и претходна SARS-CoV-2 (потврдена со PCR и/или латерална анализа на протокот) Инфекциите беа поделени со статус.'Vac + /Inf +' n = 46 (зелено), 'Vac + /Inf-' n = 182 (сино), 'Vac-/Inf +' n = 34 (жолта), 'Vac-/Inf-' n = 37 (сива).Споредбите беа направени со користење на тестот Крускал-Волис, приспособен за повеќекратни споредби користејќи го Дан тестот.Податоците се прикажуваат како графикони (средишна линија на средна, горна граница на 75-ти перцентил, долна граница на 25-ти перцентил) со мустаќи на минималните и максималните вредности.Секоја точка претставува донатор.Необработените податоци се обезбедуваат во форма на датотеки со необработени податоци.
Како и претходно, од учесниците беше побарано да пријават позитивни резултати од PCR и/или страничен проток на крв за СОВИД-19;според Здравствената агенција на ОК, се претпоставуваше дека учесниците биле заразени со коронавирусот Омикрон (B.1.1.529) во моментот на тестирање на позитивната варијанта на вирусот, бидејќи тоа беше доминантна варијанта во ОК во текот на периодот на студијата.Меѓу 299 вреднувани донатори, забележавме стапка на инфекција од 8,0% (24/299) во рок од три месеци од капиларното дарување, од кои седум не беа вакцинирани.Процентот на коморбидитети меѓу сите учесници беше помал кај оние кои тестирале позитивно за КОВИД-19 (10,7%) од оние кои тестирале негативно за СОВИД-19 (24,4%, Табела 1), што може да се должи на фактот дека учесниците со одредени болестите се повнимателни и штитат од потенцијални последици како што се дијабетес и рак.Како што е забележано во група на венска крв, САРС-КоВ-2-специфичен интерферон-γ (IFN-γ)-позитивни Т-клетки измерени во примероци од капиларна крв од поединци кои пријавиле позитивен дијагностички тест за СОВИД-19.Големината на одговорот беше значително помала отколку кај неинфицираните донори (P = 0,034; Слика 4а) поради релативно слабата индукција на одговорот на Т-клетките со вакцинација и/или претходна инфекција (Дополнителна слика 11).Слично на тоа, ниту одговорите на RBD-, S1-, S2-врзувачките IgG (слики 4б-г) ниту одговорите на антитела кои неутрализираат RBD-, S1 беа специфични за дивиот или делта SARS-CoV-2 (Б. 1.617).(Дополнителна слика 12).Може да се идентификуваат поединци со кој било значаен ризик од инфекција.За разлика од венската група, одговорите на IgG поврзани со N, исто така, не го разликуваат ризикот од COVID-19 (слика 4д), што сугерира дека варијантата Omicron (B.1.1.529) ја зголемува имунолошката евазија кај претходно заразените лица, како што неодамна беше опишано 21. Спротивно на тоа, јачината на одговорот на IFN-γ Т-клетката специфичен за SARS-CoV-2 повторно беше најважната променлива во одредувањето на индивидуалните шанси за позитивно тестирање за COVID-19 (Слика 4ѓ).Севкупно, учесниците со одговор на капиларна Т-клетка специфичен за SARS-CoV-2 ≤23,7 pg/mL IFN-γ имале 14,9% ризик од инфекција на три месеци во споредба со одговорот >141,6 pg/mL.ml IFN.-γ имаше ризик од инфекција од 4,4% (Табела 2).
Одговори на IFN-γ+ Т-клетките специфични за SARS-CoV-2 (a; *P = 0,034) и SARS-CoV-2 специфичен домен за врзување на рецепторот насочен кон IgG („RBD“) (б), подединица 1 (' S1') (c), подединица 2 ('S2') (г) и реакција на врзување на нуклеокапсид ('N') (д).Учесниците идентификувани како позитивни на тестовите за КОВИД-19 (ПЦР и/или тест за латерален проток на крв), сите инфекции се случиле во рок од 3 месеци од земањето крв.Споредбите беа направени со помош на тестот Ман-Витни со две опашки.Податоците се прикажуваат како графикони (средишна линија на средна, горна граница на 75-ти перцентил, долна граница на 25-ти перцентил) со мустаќи на минималните и максималните вредности.Секоја точка претставува донатор.ns не е важно.Топлинската карта f ги прикажува корелациите на рангот на Спирман помеѓу променливите за одредената база на податоци.Споредбите кои не беа статистички значајни беа исклучени од матрицата и означени со празни ќелии.Необработените податоци се обезбедуваат во форма на датотеки со необработени податоци.
Како што преминуваме во следната фаза на пандемијата СОВИД-19, фокусот ќе се префрли од превенција на индивидуално управување со ризик и идентификување на ранливи членови на општеството.Воспоставувањето корелации на имунитетот на СОВИД-19 е од клучно значење за ефикасно идентификување и лекување на овие високоризични групи.Сега има зголемени докази дека имунитетот на Т-клетките штити од инфекција со САРС-КоВ-2 и ја ограничува сериозноста на СОВИД-1910.Податоците презентирани овде покажуваат дека комбинираната јачина на САРС-КоВ-2-специфичните реакции на ИФН-γ+ Т-клетките против структурните протеини на шилестата, мембраната и нуклеокапсидот даваат поголема заштита од COVID-19 отколку врзувањето на антителата.19 промовираат или неутрализираат одговори .и треба да се земе предвид при проценка на индивидуалниот и/или стадо имунитет.РНК вирусите како што се САРС-КоВ-2 или вирусот на инфлуенца А (IAV) избегнуваат серолошка неутрализација со брзо еволуирање на изложените Б-клеточни епитопи на површинските антигени препознаени од антителата.Заштитниот имунолошки одговор обезбеден од Т-клетките може да го одрази таргетирањето на епитопите од позачуваните региони на вирусни протеини кои не можат брзо да избегаат од имунолошкиот одговор.Заштитата посредувана од Т-клетки против новите варијанти на САРС-КоВ-2 е слична на хетеросубтипската заштита посредувана од таргетирање на Т-клетките на конзервираните внатрешни протеини забележани во подтиповите IAV22,23.
И покрај огромниот потенцијал за мерење на клеточниот имунолошки одговор на СОВИД-19, релативно малку внимание е посветено на развојот на точни, стандардизирани тестови на Т-клетките со висока пропусна моќ.Традиционалните сложености и трошоци поврзани со мерењето на одговорите на Т-клетките го спречуваат точното одредување на имунитетот на Т-клетките при скрининг за имунитет на голема популација.Иако неодамна станаа достапни неколку комерцијални анализи за стимулација на пептиди во целата крв, секој моментално бара флеботомист за да добие крв, ограничувајќи ја достапноста и обемот.Капиларните крвни системи се широко користени за да се одреди распространетоста на антителата САРС-КоВ-2 кај популацијата.Прилагодивме анализи на капиларна крв за да извршиме анализи за стимулација на пептиди во целата крв за да ја процениме реактивноста на Т-клетките на структурните протеини на SARS-CoV-2 и специфичните одговори на антителата на SARS-CoV-2.Всушност, комбинираното мерење на специфичните антитела за SARS-CoV-2 и Т-клетките во истиот примерок од капиларна крв е многу привлечно: (i) ја намалува потребата за повеќекратни тестови на крвта по учесник, (ii) го подобрува искуството и разбирањето на учесниците;(iii) подобрување на логистиката и намалување на дуплирањето, (iv) намалување на влијанието врз животната средина бидејќи се потребни помалку лабораториски потрошен материјал и испорака на примероци.Иако целокупната реактивност на IFN-γ беше слична помеѓу соодветните примероци од венска и капиларна крв, беше забележано дека е помала во групата на капиларна крв на учесниците (сл. 4а) во споредба со групата на венска крв (сл. 2а).Вредности на IFN-γ Постојат неколку објаснувања за овој наод, имено, голем број учесници со коморбидитети кои бараат имуносупресивна терапија беа регрутирани во групата на капиларни примероци на крв (Табела 1) и Одржливост и/или функција на Т-клетките добиени од васкуларните примероците може да бидат ниски, особено земајќи ги предвид условите за долгорочно складирање на примероците пред пептидната стимулација.
Моментално широко достапната вакцина за COVID-19 обезбедува најдобра заштита од тешка болест за повеќето приматели во рок од 6 месеци од вакцинацијата8.Охрабрувачки, и покрај лошата серолошка неутрализација на варијантите на САРС-КоВ-26,7 предизвикана од вакцина, одговорите на Т-клетките предизвикани од вакцинацијата против САРС-КоВ-2 од див тип останаа многу реактивни, бидејќи се појавија 25 други.Податоците што ги презентираме овде ја демонстрираат важноста од поширока проценка на имуногеноста на вакцината, истакнувајќи ги вакцините со недоволен имунитет на Т-клетките за да се спречи ненадејна инфекција и постојан пренос на вирусот.Исто така, забележавме дека многу невакцинирани поединци регрутирани во капиларната група имале значителен одговор на специфични Т-клетки за SARS-CoV-2 (и N-врзувачки IgG) без оглед на претходната вакцинација, што веројатно се должи на претходна инфекција.Наместо да се вакцинираат соодветни поединци, нивниот ризик од инфекција треба да се процени врз основа на нивниот моментален статус на имунизација и направените информирани избори.
Ограничувањата на оваа студија го вклучуваат уверувањето дека учесниците сами пријавиле инфекција со САРС-КоВ-2 по собирањето крв за да се утврди релевантноста на имунитетот;некои учесници може да имаат асимптоматска инфекција и не можат да се подложат на PCR и/или латерално тестирање за КОВИД-19.На нашата база на податоци, исто така, недостасуваа информации за лековите на учесниците за време на земање примероци од крв.Дополнително, имајќи предвид дека сите наши учесници пријавија само благи/умерени симптоми или никакви симптоми, не беше возможно да се идентификуваат имунолошките одговори од нашиот збир на податоци што предвидуваа зголемен ризик од тешка болест и хоспитализација за СОВИД-19.Сепак, присуството на одговори на ЦД8+ Т-клетките против епитопи специфични за нуклеокапсид неодамна беше поврзано со заштита од тежок КОВИД-1926.Дополнително, анализата што се користи овде не ги мери одговорите на Т-клетките на специфични рано изразени неструктурни протеини на SARS-CoV-2 за кои неодамна се покажа дека преференцијално се акумулираат кај серонегативни здравствени работници кои биле во контакт со заразени пациенти.Врз основа на оваа работа, со оглед на распространетоста на преносот во заедницата за време на регрутирањето и големата веројатност за контактна инфекција кај популацијата, бројот на специфични Т-клетки на SARS-CoV-2 пронајдени во нашите тестови, исто така, се чини дека може да се исчисти.субклинички инфекции во нашите групи.Конечно, не го измеривме производството на интерлеукин 2 од Т-клетките бидејќи нашата претходна работа покажа лоша идентификација на одговорите на Т-клетките специфични за SARS-CoV-214, иако одговорите специфични за IL-2 може да укажуваат на веќе постоечка вкрстена реактивност.клетки поврзани со одбрана од инфекција со SARS-CoV-211.
Земени заедно, овие податоци ја нагласуваат основната потреба за долгорочни лонгитудинални студии кои ги инкорпорираат одговорите на Т-клетките специфични за САРС-КоВ-2 во мерките на имунитетот на ниво на популација.Овие напори може да бидат потпомогнати со развојот на нов капиларен тест на крвта кој го мери одговорот на Т-клетките.
Истражувачкиот проект регрутираше учесници од февруари 2021 до март 2022 година. Групата здрави донатори (n = 148) кои донираа примероци од венска крв се состоеше првенствено од универзитетски персонал и студенти кои учествуваа во службата за скрининг COVID-19 на Универзитетот Кардиф или персонал во основно училиште во Кардиф.Сите учесници беа инаку здрави и не пријавија дека земаат имуносупресивни лекови (види Табела 1 за карактеристики).Групата учесници кои донираа примероци од капиларна крв ги вклучи сите доброволни дарители (на возраст над 18 години) од цела ОК.Помеѓу 24 јануари и 14 март 2022 година, во студијата биле запишани 342 учесници, од кои 299 поднеле примероци од крв во лабораторијата.Многу учесници останале невакцинирани и/или пријавиле сериозни коморбидитети, вклучувајќи автоимуни болести и рак (види Табела 1 за карактеристики).Оваа студија доби етичко одобрение од Комитетот за етика на истражувањето на Њукасл и Норт Тајнсајд 2 (ID IRAS: 294246) и Етичкиот комитет за медицински истражувања на Универзитетот во Кардиф (SREC ref: SMREC 21/01).Сите учесници дадоа писмена информирана согласност пред вклучувањето.Учесниците не добија никаков надомест за учество во оваа студија.
Примероците од венска крв беа добиени со венпункција во вакутајнери со литиум или натриум хепарин (BD) од 6 или 10 ml.Примероците од капиларна крв беа добиени со ланцета на прстот, а потоа собрани во микроконтејнери за хепарин (BD).Потребни се минимум 400 µl крв;секој примерок помал од оваа сума ќе биде отфрлен.Други причини за отфрлање на примерокот вклучуваат масивна коагулација и/или хемолиза и неуспех да се собере вискозна плазма за анализа (Дополнителна слика 5).Вкупно 299 примероци од капиларна крв беа достапни за проценка на одговорите на антителата, од кои 270 примероци беа достапни и за проценка на одговорот на Т-клетките.
Специфичните одговори на Т-клетките на САРС-КоВ-2 беа оценети со помош на анализата на Имуно-Т за COVID-19 (ImmunoServ Ltd) и беа изведени како што беше претходно опишано14.Накратко, еден венски вакутајнер од 6 ml или 10 ml натриум хепарин (BD) беше земен од секој учесник и обработен во лабораторија во рок од 12 часа по собирањето на крвта.Иако повеќето примероци беа обработени во рок од 24 часа, една капиларна крв со хепаринизирана микрокрварење (БД) од 400-600 μl беше собрана во рок од 48 часа по земање примероци од прст.Примероците од венска и/или капиларна крв беа стимулирани со посебни пептидни базени специфични за САРС-КоВ-2 (варијанта од див тип) како што беше претходно опишано14.Оваа пептидна библиотека содржи 420 15-мерни секвенци со 11 преклопувачки амино киселини кои го опфаќаат целиот протеин на шилеста (S1 и S2) (S; NCBI протеин: QHD43416 1), нуклеокапсид фосфопротеин (NP; NCBI протеин: QHD43423 мембрана протеин (2M) NCBI протеин: QHD43419 1) кодирање секвенци (наведени како „S-/NP-/M-комбинаторна пептидна библиотека“).Сите пептиди беа прочистени до >70%, растворени во стерилна вода и користени во конечна концентрација од 0,5 μg/ml по пептид.Примероците се инкубираат на 37°C 20-24 часа.Цевките потоа беа центрифугирани на 5000 × g за 3 минути и ~ 150 µl плазма беа собрани од врвот на секој примерок од крв.Чувајте ги примероците од плазмата на -20°C до еден месец пред да започнете со анализи за откривање цитокини/антитела.
IFN-γ беше измерен со користење на IFN-γ ELISA MAX Deluxe Set (BioLegend, каталог број 430116) и изведен според упатствата на производителот.Веднаш по додавањето стоп раствор (2N H2SO4), микроплочката беше прочитана на 450 nm со помош на читач на BioLegend Mini ELISA плоча.IFN-γ беше квантифициран со стандардна екстраполација на кривата користејќи GraphPad Prism.Вредностите под долната граница на откривање на анализата беа евидентирани како 7,8 pg/ml, вредностите над горната граница на детекција на анализата беа евидентирани како 1000 pg/ml.
Anti-SARS-CoV-2 RBD/S1/S2/N IgG антителата беа измерени со помош на Bio-Plex Pro Human IgG SARS-CoV-2 4-плекс панел (Bio-Rad, кат. бр. 12014634) и означени според упатствата на производителот.инструкции .Вредностите за известување на примероците над границата на квантитацијата беа повторно анализирани со разредување 1:1000.Просечниот интензитет на флуоресценција на зрната беше измерен на инструмент Bio-Plex 200 (Bio-Rad).Концентрациите на антителата беа пресметани со единечна контролна анализа VIROTROL SARS-CoV-2 (Bio-Rad) и беа претворени во меѓународни референтни стандардни единици на WHO/NIBSC 20/136 (BAU/mL) користејќи го факторот за калибрација на производителот.
RBD и S1 подединица специфични неутрализирачки антитела против SARS-CoV-2 диви и делта (B.1.617) SARS-CoV-2 линии беа измерени со користење на Bio-Plex Pro Human SARS-CoV-2 варијанта за неутрализирање на антитела (Bio -Рад , дел бр.12016897), според упатствата на производителот.Измерете го просечниот интензитет на флуоресценција на Bio-Plex 200 (Bio-Rad) и пресметајте го процентот на инхибиција (т.е. неутрализација) користејќи ја следната формула:
Анализите за неутрализација на инфекцијата за САРС-КоВ-2 беа извршени како што беше претходно опишано28.Накратко, 600 PFU од див тип SARS-CoV-2 беа инкубирани со 3-кратно сериско разредување на плазмата во дупликат за 1 час на 37°C.Смесата потоа се додава во клетките VeroE6 48 часа.Монослоевите беа фиксирани со 4% параформалдехид, пропустливи со 0,5% NP-40 и инкубирани 1 час во блокирачки пуфер (PBS што содржи 0,1% твен и 3% обезмастено млеко).Примарното антитело (анти-нуклеокапсид 1C7, Stratech) беше додадено во блокирачкиот пуфер 1 час на собна температура.По миењето, секундарно антитело (анти-глувче IgG-HRP, Пирс) беше додадено во блокирачкиот пуфер за 1 час.Монослоевите беа измиени, развиени со користење на Sigmafast OPD и се читаа на читач на Clariostar Omega плоча.Во секој експеримент како контроли беа вклучени бунари без вирус, без вирус, но без антитела и нормализирани серуми кои покажуваат средна активност.
Статистичката анализа беше спроведена во GraphPad Prism (верзија 9.4.1).Нормалноста на збирот на податоци беше тестирана со помош на тестот Шапиро-Вилк.За сите споредби се користени непараметриски критериуми.Тестот Ман-Витни беше користен за неспарени примероци.Сите тестови беа двострани со праг на номинална значајност од P ≤ 0,05.
Првичната истражувачка анализа на сетот беше направена во R (верзија 4.0.3).Ова го вклучува развојот на матрицата за корелација на униваријантен ранг на Спирман, каде што корелацијата помеѓу две променливи е претставена со големината и бојата на квадратите.Статистичката значајност помеѓу асоцијациите беше пресметана со помош на Spearman's rho, каде вредностите ≤0,05 се сметаа за значајни.Споредбите кои не беа статистички значајни беа исклучени од матрицата и означени со празни ќелии.P-вредностите беа прилагодени за повеќекратни споредби со помош на Холмовата корекција.Беше користен модел на бинарна логистичка регресија за да се симулира ефектот на променливите во збирката податоци врз позитивниот одговор на COVID-19.Одговорите на IFN-γ Т-клетките и анти-RBD/S1/S2/N IgG титарните резултати беа претворени во фактори, каде што секој поединец беше доделен на соодветниот квартал за секој резултат.После тоа, беше развиен иницијален модел на истражување користејќи ја функцијата glm во статистичкиот пакет (V4.0.3).Коефициентите на шансите добиени од овој оригинален модел беа извлечени од коефициентите на моделот користејќи ја функцијата 'odds_plot' во пакетот OddsPlotty (V1.0.2).Кога го развивавме моделот за вкрстена валидација, ја користевме функцијата „bestglm“ од пакетот bestglm (V0.37.3) за да ја ограничиме пристрасноста на корисниците и да обезбедиме дека може да се избере најдобрата подгрупа на предвидувачи.Избраниот метод беше „исцрпен“, а информативниот критериум што се користеше за да се оцени соодветноста на моделот беше AIC.Истиот работен тек опишан погоре беше искористен за да се добие соодносот на шансите.
За повеќе информации за дизајнот на студијата, видете го апстрактот на студијата за природата поврзан со овој напис.
Писмата и барањата за материјали треба да се упатат до д-р Мартин Скар или професорот Ендрју Годкин.Оваа статија ги дава оригиналните податоци.
R кодот што се користи за креирање статистички модели е јавно достапен без барање29.Информациите и лиценците за повторно печатење може да се најдат на www.nature.com/reprints.
Манро, АПС и сор.Безбедност и имуногеност на седум вакцини COVID-19 како трета доза (засилувач) по две дози ChAdOx1 nCov-19 или BNT162b2 (COV-BOOST) во ОК: фаза 2, заслепено, мултицентрично, рандомизирано, контролирано испитување.Лансет 398, 2258-2276 (2021).
Стјуарт, АСВ и сор.Имуногеност, безбедност и реактогеност на хетерологната примарна вакцинација против COVID-19 (Com-COV2) со помош на mRNA, вирусни вектори и протеински адјувантни вакцини во Обединетото Кралство: фаза 2, еднослепа, рандомизирана студија, тест за неинфериорност.Лансет 399, 36-49 (2022).
Ли, АРИБ и сор.Ефикасноста на вакцините COVID-19 кај имунокомпромитирани пациенти: систематски преглед и мета-анализа.BMJ 376, e068632 (2022).
Dejnirattisai, W. et al.Намалена неутрализација на SARS-CoV-2 микронска варијанта B.1.1.529 со серум по имунизација.Лансет 399, 234-236 (2022).
Lipsich M, Krammer F, Regev-Yohai G, Lustig Y и Baliser RD Пробивната инфекција кај индивидуи вакцинирани со SARS-CoV-2: мерење, причини и последици.Националниот свештеник за имунологија.https://doi.org/10.1038/s41577-021-00662-4 (2021).
Левин, ЕГ и сор.Ослабен имунолошки хуморален одговор на вакцината BNT162b2 Covid-19 за 6 месеци.Н. инж.J. Медицина.385, e84 (2021).
Carreño, JM et al.Активност на реконвалесцентни и вакцински серуми против SARS-CoV-2 Omicron.Nature 602, 682-688 (2022).
Chemaitelly, H. et al.Времетраење на заштитата на катарската mRNA вакцина против SARS-CoV-2 Omicron BA.1 и BA.2 подваријанти.medrxiv https://doi.org/10.1101/2022.03.13.22272308 (2022).
Таи, МЗ и сор.Фреквенцијата на мемориските Б-клетки се намалува со пробивната инфекција на делта вакцината COVID-19.Молекуларна медицина EMBO.14, e15227 (2022).
Кунду, Р. и сор.Вкрстено-реактивни мемориски Т-клетки се поврзани со заштита на контактите со COVID-19 од инфекција со SARS-CoV-2.Национална комуна.13, 80 (2022).
Геурцван Кесел, CH и сор.Карактеристични одговори на SARS CoV-2 омикрон-реактивни Т-клетки и Б-клетки кај примателите на вакцината COVID-19.науката.имунологија.https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo2202 (2022).
Гао, Ју и сор.Наследените Т-клетки специфични за SARS-CoV-2 вкрстено ги препознаваат варијантите на Omicron.Национална медицина.28, 472-476 (2022).
Скар, МЈ и сор.Мерењето на САРС-КоВ-2-специфични Т-клетки од целата крв открива асимптоматска инфекција и имуногеност на вакцината кај здрави индивидуи и пациенти со рак на цврсти органи Имунологија https://doi.org/10.1111/imm.13433 (2021).
Тан, АТ и сор.Брзо мерење на шилести Т-клетки на SARS-CoV-2 во целата крв на вакцинирани и природно инфицирани лица.J. Клинички.инвестираат.https://doi.org/10.1172/JCI152379 (2021).
Tallantyre, EU et al.Одговор на вакцината COVID-19 кај пациенти со мултиплекс склероза.инсталирај.Неврони.91, 89-100 (2022).
Бредли РЕ и сор.Постојаната инфекција COVID-19 со синдром Вискот-Олдрич исчезна по терапевтската вакцинација: извештај за случај.J. Клинички.имунологија.42, 32-35 (2022).